Chefs d'équipe

 

 

Jamal Khalife : Contact

 

&

 

Christine Pierrot : Contact

Jamal KHALIFE: 0000-0002-4359-8976
Christine PIERROT : 0000-0002-6835-6789

Phosphatases dans la signalisation cellulaire et moléculaire dans Plasmodium

Il est devenu clair que les actions coordonnées et réciproques des kinases et des phosphatases sont des mécanismes de régulation fondamentaux pour le développement et la croissance du parasite du paludisme. Dans de nombreux organismes, la Protéine Phosphatase de type 1 (PP1) est l'une des principales phosphatases et la mieux caractérisée sur le plan fonctionnel et biochimique. La sous-unité catalytique PP1 (PP1c) a diversifié sa fonction grâce à la présence de protéines régulatrices qui forment avec la sous-unité catalytique des enzymes très spécifiques (spécificité du substrat, localisation / trafic, contrôle de l'activité phosphatase de PP1c). Chez P. falciparum (Pf), la forme de paludisme la plus mortelle, bien que le PP1c (PfPP1c) ait été identifié et malgré son importance biologique, très peu de données ont été rapportées sur les sous-unités réglementaires et sur la base moléculaire du contrôle des fonctions du PfPP1c.

Pour remplir sa fonction appropriée et précise requise pendant le cycle de vie de P. falciparum, PfPP1c doit être étroitement et spatialement contrôlé. Sur la base de la séquence / structure bien conservée de PP1c (des champignons à l'homme) et de la haute spécificité du génome de P. falciparum (~ 50-60% de protéines inconnues) et de son mécanisme de division cellulaire distinctif, il est concevable que les deux conservés et des régulateurs spécifiques de PfPP1c sont présents et développés par le parasite.

Par conséquent, l'objectif général de notre projet est de caractériser le régulatome de PfPP1 en exploitant le génome de P. falciparum et par une approche approfondie utilisant un système à deux hybrides de levure à haut débit. En étudiant les régulateurs de PP1, nous visons à fournir des informations fondamentales sur la régulation de PfPP1 au niveau moléculaire. Cela permettra, dans un objectif à long terme, de moduler sélectivement les voies de signalisation spécifiques pour inhiber la croissance des parasites.


Chef de groupe

Mathieu Gissot

Contact

 

 

0000-0003-0047-8189

Découvrir la composition et les rôles du pore nucléaire de T.gondii

Le complexe des pores nucléaires (NPC) est une structure clé chez les eucaryotes régulant le transport nucléaire-cytoplasmique ainsi qu'un large éventail de processus cellulaires. Chaque NPC est composé de plusieurs copies d'environ 30 protéines différentes appelées nucléoporines (NUP), dont la composition et la structure ont été largement caractérisées chez la levure, les mammifères et Trypanosoma brucei. Étonnamment, la description des composants putatifs du NPC chez T. brucei a conduit à la découverte d'un arrangement protéique conservé qui s'étend sur le royaume eucaryote. Cependant, la composition du NPC n'a pas été examinée chez les parasites apicomplexes. Nous avons découvert des NUP potentiels chez T. gondii en utilisant une purification par affinité. La plupart de ces protéines ne partagent pas la conservation de la séquence primaire avec les NUP eucaryotes connus. Nous explorons maintenant le rôle de ces protéines dans plusieurs processus tels que la régulation des gènes, la régulation du cycle cellulaire et la séquestration de la chromatine.

Personnel impliqué dans le projet: Mathieu Gissot (PI), Ludovic Huot et Thomas Mouveaux.

 

Chef de groupe:

Sabrina Marion

Contact

 

 

0000-0001-7824-955x

Voies de trafic vésiculaire impliquées dans la formation de ROP et MIC et l'exocytose de protéines granulaires denses

Les organites de rhoptry et de microneme sont formés de novo à chaque cycle de réplication par bourgeonnement et fusion de vésicules émergeant de l'appareil de Golgi, qui suivent ensuite des voies sécrétoires distinctes pour finalement former des organites matures. Des études récentes ont révélé certaines des routes de trafic empruntées par les protéines MIC et ROP, en examinant les fonctions des compartiments endo-exocytaires, et ont également identifié des molécules de transport, telles que le DrpB de type dynamine, les complexes HOPS / CORVET et le récepteur TgSORTLR, requis pour la biogenèse des organites. En revanche, la biogenèse et la sécrétion de granules denses (GRA) restent pour la plupart inexplorées. En général, bien qu'étant cruciaux pour le développement de la maladie, les mécanismes régulant les échanges entre le parasite et son environnement externe sont mal élucidés: par exemple, les protéines GRA, libérées dans l'espace vacuolaire, jouent un rôle essentiel pour l'établissement de toxoplasmose chronique en assurant la formation de kystes dans les tissus neuronaux. Les protéines GRA et ROP représentent également des facteurs clés qui modulent la réponse immunitaire des cellules infectées. En utilisant la génétique inverse, la protéomique, l'imagerie en direct et la microscopie haute résolution, nous avons récemment identifié de nouveaux effecteurs spécifiques au parasite du trafic de protéines MIC et ROP ainsi que des régulateurs clés de l'exocytose des vésicules vers la membrane plasmique du parasite et l'espace vacuolaire.

Notre objectif est de découvrir de nouvelles voies sécrétoires vésiculaires régulant l'invasion, la survie et la virulence des parasites.

Subversion des cellules dendritiques par T.gondii

Les cellules dendritiques (CD) sont des cellules immunitaires clés qui déclenchent la réponse pro-inflammatoire contre l'infection à Toxoplasma gondii, empêchant ainsi la dissémination des parasites et les maladies aiguës. Les DC infectées sécrètent la cytokine pro-inflammatoire IL-12, qui déclenche la sécrétion d'IFNg par les cellules NK et les lymphocytes CD4 + / CD8 +, une cytokine majeure qui stimule la réponse cytotoxique, responsable de l'élimination des parasites et de l'établissement d'une toxoplasmose latente. De plus, les CD sont des cellules professionnelles présentant des antigènes qui sont spécialisées dans le chargement de peptides dérivés de sources exogènes et endogènes sur des molécules du CMH de classe I et II pour une présentation aux cellules T CD8 + et CD4 +, respectivement. T. gondii a développé des stratégies pour échapper à la réponse immunitaire en sécrétant des facteurs parasitaires clés dans le cytosol hôte qui modulent les activités des CD, telles que la sécrétion de cytokines et la présentation de l'antigène. Ces effecteurs parasitaires contenus dans les rhoptries et les granules denses interfèrent avec les voies de signalisation clés impliquées dans la régulation de la réponse pro-inflammatoire et bloquent les mécanismes de défense cellulaire, tels que la lyse médiée par l'IRG de la vacuole parasitophore (PV).

Notre objectif est de caractériser la façon dont les protéines ROP et GRA présentes dans la membrane PV manipulent la machinerie des cellules hôtes impliquées dans la présentation croisée des antigènes sur les molécules du CMH I et modulent l'homéostasie du réticulum endoplasmique dans les CD infectés.

Personnes impliquées dans le projet: Sabrina Marion (PI), Anais Poncet (doctorante) et Ludovic Huot (ingénieur).